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如何正確地檢測和保存氨基柱:方法與注意事項

更新時間:2023-04-24      點擊次數:611

氨基柱的柱效檢測及保存方法

氨基柱是以硅膠作為基質載體,鍵合氨基的色譜柱。氨基柱通常用于分析糖類化合物,所使用的流動相通常是甲醇、乙腈和緩沖鹽溶液,其中乙腈的使用相對較多。

使用氨基柱時易受水解影響,因此需要注意以下事項:

  1. pH值越低,水解發生的危險性越大,因此應嚴格控制pH范圍;

  2. 流動相中水的比例越高,水解發生的危險性越大。

因此,在使用后以及長時間放置該柱前,必須進行必要的清洗,并將氨基柱保存于純的有機溶劑中以進行保養。

氨基柱的柱效檢測:

柱效檢測是判斷一個用戶的經驗是否足夠的指標之一,用戶可以習慣配制一些柱效檢測標準溶液。在柱效檢測方面,我們提供一個通用的方法,可用于檢測硅膠柱和氰基柱。

流動相:10% 乙酸乙酯 + 90% 正己烷,流速為1.0。

標準溶液:乙苯(或甲苯)+苯甲酸甲酯。

檢測波長為254nm。

此方法特別適用于剛購買氨基柱時進行檢測,如有問題,可及時與氨基柱廠家溝通。此外,建議在柱子準備放置相當長一段時間之前,進行充分清洗后進行檢測,以作為記錄留存。在平常的使用過程中,如果分析物是重復的,可以根據分析物的分離情況判斷氨基柱效;但是,如果分析物和分析條件不同時,定期檢測柱效可以避免柱效下降導致分離不佳再分析查找原因這樣浪費時間和勞力的過程。特別要注意的是,當氨基柱(或氰基柱)在反相條件下使用時,請注意流動相的換相過渡問題。

氨基柱沖洗:

在使用正相條件下的氨基柱時,可按硅膠柱的清洗方法進行清洗;在使用反相條件下的氨基柱時,則應按照C18柱的清洗方法進行清洗。

氨基柱的保存:

  1. 在正相條件下,使用氨基柱后,將柱子清洗干凈,并用正己烷-乙腈(比例為99:1)保存。

  2. 在反相條件下,如短期不使用,可用甲醇或乙腈進行保存。若長期不使用,則需要將甲醇逐步用異丙醇和CHCl3置換,最后用正己烷保存。


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